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志贺菌具有

葡萄糖6O酸酶

血c反应蛋白临床意义

实时荧光pcr技术

志贺菌具有

1、【摘要】目的对标本中的志贺菌属进行培养与鉴定。方法对门诊患者粪便标本运用SS和中国蓝培养基培养志贺菌属，并进行生化，血清学鉴定和药敏试验。结果志贺菌属发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵O糖、蔗糖，氧化酶试验阴性，IMVC 为（-+--），KIA为（KA--），MIU为（---），药敏试验：左氧O沙星、复方新诺明、头孢噻肟、泰能四种药敏纸片的抑菌圈分别为30㎝、34㎝、38㎝、30㎝。结论分离出志贺菌属，对左氧O沙星、复方新诺明以及氨苄等的敏感性较高，为临床治疗提供可靠的治疗方案。

2、【引言】志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾，福氏，鲍氏和宋内志贺菌四群。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。我们用临床门诊患者粪便标本进行培养与鉴定实验，现将实验分析情况报告如下：

3、血平板，MAC培养基，SS培养基，KIA培养基，半固体培养基，酒精灯，接种环，接种针，载玻片，培养箱，光学显微镜，氧化酶纸片，药敏纸片，微量生化管，生理盐水，革兰染液，氧化酶试剂，甲基红试剂，吲哚试剂，液体石蜡，志贺菌诊断血清（包括志贺菌属四种多价血清及福氏，鲍氏或宋内志贺菌单价血清）等

4、分离培养：取粪便或肛拭标本，用接种环挑取粪便中有脓血和黏液的部分直接在中国蓝培养基和SS培养基分区划线进行培养。使之分散成单个细菌，在37℃培养18~24h，从而分离出单个菌落。

葡萄糖6O酸酶

1、目的 构建生产辅酶Q10的大肠杆菌基因工程菌并研究相关酶的表达情况.方法 将荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus B10)中十聚异戊二烯焦O酸合成酶编码基因ddsA分别OO在Lac,T7和Trc启动子下游,使其在Escherichia coli JM83中表达.同时利用His-tag的表达系统,对该酶的融合表达和镍柱纯化条件进行了研究.结果 产物分析发现该基因在E.coli中表达出有活性的十聚异戊二烯焦O酸合成酶,并使宿主产生辅酶Q同时,28℃培养过夜,该酶以可溶形式存在于上清液中.在150 mmol·L-1咪唑的洗涤条件下,从镍柱上解离,并可以达到电泳纯.结论 大肠杆菌可以表达Rhodobacter capsulatus B10的十聚异戊二烯焦O酸合成酶,并合成辅酶Q

血c反应蛋白临床意义

1、1理化生物学性质CRP是机体的一种重要的急性期蛋白,由相对分子质量为202×103的5个亚单位组成,每个亚单位有206个氨基酸残基。完整的CRP是一种环形结构的五聚体,在急性期反应时肝细胞在IL-6等细胞因子诱导下大量合成CRP。正常情况下每天合成1~10mg,急性期炎性反应时每天可合成1g。外科损伤患者CRP水平8~10h可增加1倍(在IL-6OO物缺乏时2~4h内合成并降至正常)。循环中CRP的半衰期为19h。但一旦它与配体结合,可快速被清除[1]。

2、2CRP的合成代谢CRP是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎性反应OO时肝细胞合成的急性时相蛋白,能结合大范围的内源和外源性物质,通过调理作用促进其从血液及组织中清除,在钙离子存在的情况下,CRP能结合坏死的内源性物质和效应细胞,CRP可与许多细菌、真菌、寄生虫的细胞壁O酰胆碱和人细胞膜O酰胆碱结合产生活性和完整的有机体,一旦结合了其中之一的CRP配体就能够激活大量的生物系统,并通过一定程序致配体消除[2]。

3、2CRP生理和病理作用近年来研究显示,CRP在体内能识别和启动靶效应细胞及其产物,从组织中清除可能有毒性的或引起自身过敏的DNA,充当先天防御机制,这些功能对于那些缺乏免疫系统的原始动物中与CRP相似的pentraxins族有利且至关重要。

4、1对非特异性免疫功能影响CRP是非特异性免疫机制的一部分,它可以结合肺炎链球菌的荚膜C-多糖,在钙离子存在下可结合膜上的O酸胆碱、染色质,可激活补体途径,增强白细胞的吞噬作用,在OO淋巴细胞或单核/巨噬细胞活化时起调理素作用,对细菌感染能迅速地发生反应[3]。

实时荧光pcr技术

1、目的利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的产气荚膜梭菌检测方法。方法以产气荚膜梭菌基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以产气荚膜梭菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的灵敏度、特异性、重复性。结果反应体系在上、下游引物浓度均为1μmol/L,探针浓度为0.1μmol/L时,具有良好的特异性和灵敏度,与创伤弧菌等24种相关细菌均无交叉反应,对纯菌检测的灵敏度为9×102CFU/ml,重复性试验证实该体系重复性好,稳定性高;3例临床样本检测结果与细菌培养结果相符。结论建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对临床气性坏疽做出快速准确的报告,实现对气性坏疽战时高发性疾病安全、快速和定量检测。 （共5页)