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摘要：目的：建立测定维生素B6片中2个潜在毒性杂质A、杂质B方法。方法：色谱条件为Kromasil C18（4.6 mm×250 mm，5μm），0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0）-甲醇（85：15），检测波长为219 nm。结果：杂质A在8.96 ng~357.15 ng的范围内峰面积呈良好的线性关系；杂质B在10.15~404.33 ng的范围内峰面积呈良好的线性关系；杂质A、杂质B的检测限分别约为1.80、2.03 ng。结论：该方法专属性强、精密度高、线性良好、操作方便高效。
关键词：维生素B6；杂质A；杂质B；高效液相
0引言
维生素B（6 VB6）又名吡哆辛，在自然界中以吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺三种形式存在[1-4]。通常肉类、全谷类产品（特别是小麦）、蔬菜和坚果类中含量较高。动物性来源的食物中维生素B6的生物利用率优于植物性来源的食物[5]。维生素B6是色氨酸转变为5-羟色胺反应中的辅助因子[6]。人类食用缺乏维生素B6的膳食并用吡哆醇对抗剂去氧吡哆醇，几周内即可产生眼、鼻和口部溢脂样皮肤损害伴有舌炎和口腔炎。动物和人持续食用缺乏吡哆醇的食物，可引起惊厥发作、意识障碍，维生素B6可防止或治疗这些发作[7-9]。
药物的杂质与药品安全性的关系是一个受很多因素影响的复杂的关系，通常药物中的杂质大多具有潜在的生物活性，有的甚至与药物相互作用从而影响药物的效能和安全性，严重的可能产生毒性作用。并且杂质存在不仅影响药物的质量，而且还可能导致生产贮藏过程中出现质量问题，在体内累积可能会对人体健康造成更大伤害。因此，对药物所含杂质进行检查既可保证用药的安全、有效，同时也为生产、流通过程的质量保证和企业管理的考核提供依据。
1仪器与试药
美国Agilent公司1100型高效液相色谱仪；维生素B6对照品。来源：中国食品药品检定研究院，批号：100116-202204，纯度：100.0%；杂质A，来源：EP，Code：Y0001226，Batch：3.1；杂质B，来源：TCI，批号：ODCPN-AO；甲醇，Welpure，色谱纯，批号：833770；戊烷磺酸钠，天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯，批号：20230110；冰醋酸，天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯，批号：20230503。盐酸，洛阳昊华化学试剂有限公司，分析纯，批号：220128；氢氧化钠，天津市天力化学试剂有限公司，分析纯，批号：20220601；30%双氧水，天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯，批号：20230618。本实验用水均为纯化水。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Kromasil C18（4.6 mm×250 mm，5μm），0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0）-甲醇（85：15）检测波长为219 nm；进样量10μL；流速1.0 mL/min。
2.2专属性试验
1）对照品溶液的制备：分别精密称取VB6、杂质A、杂质B分别用流动相配成0.1 mg/mL溶液，分别作为VB6对照品储备液、杂质A对照品储备液、杂质B对照品储备液。
2）混合对照品溶液的制备：分别精密量取上述VB6对照品储备液、杂质A对照品储备液、杂质B对照品储备液分别用流动相制成0.02 mg/mL溶液。精密量取VB6、杂质A、杂质B对照品溶液各1μL及混合对照品溶液10μL测定得该方法专属性良好。混合对照品溶液分离色谱图见图1。
2.3系统适用性试验
取维生素B6片细粉约433 mg，配制成约4.3 mg/mL的质量浓度，作为供试品溶液。进行测定得主成分理论板数为5 618，符合规定（不得低于4 000）。
2.4进样精密度
精密量取“系统适用性试验”项下的供试品溶液用流动相稀释500倍作为对照溶液（0.2%）。精密量取对照溶液与供试品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，连续进样6次，按峰面积计算，0.2%对照溶液连续6针的主成分保留时间、峰面积RSD分别为0.32%、0.45%；供试品溶液连续6针的主成分保留时间、峰面积RSD分别为0.64%、0.09%，均小于1.5%，进样精密度良好。
2.5耐用性考察
取“系统适用性试验”项下的供试品溶液作为考察对象，通过改变流速、柱温、流动相组成的水相pH值、流动相组成的水相与有机相比例、不同厂家不同批号的色谱柱（见表1），结果耐用性良好。
2.6线性关系
取“专属性试验”项下的对照品储备液和混合对照品溶液（1）；混合对照品溶液（2）：精密量取混合对照品溶液（1）稀释10倍即得。
分别吸取混合对照品溶液（1）20、10、5μL，分别混合对照品溶液（2）20、10、5μL进行测定。以峰面积Y为纵坐标，进样量X（ng）为横坐标，绘制回归曲线，计算得VB6的回归方程为：Y（面积）＝2 021.685 92+5 250.412 04X，r=1.000 00（n=6）；杂质A的回归方程为：Y（面积）＝-764.463 5+3 847.445 01X；杂质B的回归方程为：Y（面积）＝5 200.503 82+4 185.416 48X，r=0.999 99（n=6）。由以上回归方程可得出，VB6在10.45~416.38 ng的范围内呈良好的线性关系；杂质A在8.96~357.15 ng的范围内呈良好的线性关系；杂质B在10.15~404.33 ng的范围内呈良好的线性关系。
2.7检测限
精密量取“线性关系”项下混合对照品溶液（2）按表2中浓度测定，VB6、杂质A、杂质B的检测限分别约为1.05、1.80、2.03 ng，分别相当于对照溶液进样量的1/19、1/11、1/10，仪器的灵敏度符合要求。
2.8精密度
2.8.1重复性
供试品溶液制备同“2.3”项下制备方法，用流动相稀释500倍。同法制备6份供试品溶液和6份对照溶液。照“2.1”项下的色谱条件，精密量取对照溶液与供试品溶液各10μL，进行测定。由试验结果得出6份样品测定的最大单杂、总杂含量均无变化，重复性良好。
2.8.2中间精密度
更换高效液相色谱仪与实验人员，制备6份供试品溶液和6份对照溶液，按重复性项下操作，同法测定，结果得出6份样品测定的最大单杂、总杂含量均无变化，与重复性6份样品的测定结果无显著偏差，中间精密度良好。
3总结与讨论
实验结果表明采用拟定高效液相色谱法来检查维生素B6片中2种潜在毒性杂质，可以有效检测出确立了杂质和含量的限度要求。维生素B6的主成分、各杂质之间均能达到较好的分离效果，为保证产品安全、有效提供了科学依据。
参考文献
[1]方学辉，吴倩，韩雪梅，等.大剂量维生素B6预防卡培他滨所致的手足综合征[J].肿瘤，2010，30（12）：1081-1082.
[2]杨帆，杨军，濮忠健，等.TACE术后联合斑蝥酸钠维生素B6治疗原发性肝癌患者近期疗效研究[J].实用肝脏病杂志，2024，27（2）：263-266.
[3]李雯，陶翔宇，李照谊，等.碱性高锰酸钾三波长分光光度法测定维生素B6的含量[J].化工时刊，2024，38（1）：25-28.
[4]周新星，张玲玲，周晓莹，等.保健食品中B族维生素的快速分析方法研究[J].食品安全导刊，2023（30）：97-100.
[5]李芳，孙立亚，杨丽英，等.复合预混合饲料和维生素预混合饲料中的脂溶性维生素和水溶性维生素的含量测定方法[J].天津化工，2024，38（1）：73-77.
[6]Li T，Rong S.中老年人群饮食来源的B族维生素摄入量与睡眠质量的关联性研究（英文）[C]//亚洲营养学会联合会，中国营养学会.Abstract Book of the 14th Asian Congress of Nutrition--Public Nutrition&Health.2023：1.
[7]Wang S，Zhang X，Zhang Z，et al.Fusarium-produced vitamin B6 pro-motes the evasion of soybean resistance by Phytophthora sojae[J].Journal of Integrative Plant Biology，2023，65（9）：2204-2217.
[8]李自芹，李先义，张正红，等.西藏自治区不同产地和品种青稞的B族维生素含量差异研究[J].农产品质量与安全，2024（1）：85-88.
[9]商云帅，解道博，谢新娜，等.高效液相色谱法同时测定薏米中3种B族维生素[J].现代食品，2023，29（14）：193-197.后台-系统设置-扩展变量-手机广告位-内容正文底部 -
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HPLC法测定维生素B6片中2个潜在毒性杂质的研究及控制论文
人参与 2024-12-26 11:41:37 分类 : 理学 点这评论 作者：团论文网 来源：https://www.tuanlunwen.com/
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